FUNDAMENTO
TEÓRICO
Las bacterias son
organismos unicelulares procariontes, esto quiere decir que están formados por
una sola célula carente de núcleo. Su ácido desoxirribonucleico (ADN) se
encuentra libre en el citoplasma y no tienen organelos, como las mitocondrias,
cloroplastos o aparato de Golgi. A pesar de su sencilla organización celular,
cuentan con una pared celular (capa de polisacáridos) que envuelve la célula
proporcionándole rigidez y protección. Son tan pequeñas que es imposible verlas
a simple vista, solamente cuando llegan a agruparse formando colonias es cuando
las podemos reconocer.
Se reproducen
asexualmente por medio de una forma de división celular denominada fisión
binaria, que produce copias genéticamente idénticas a la célula original. En
condiciones ideales, algunas bacterias se duplican en cuestión de minutos por
lo que podrían en principio, dar origen a una población de millones de
bacterias en poco tiempo.
Son prácticamente
omnipresentes ya que habitan casi todos los hábitats de la Tierra, los científicos
las consideran como los seres más numerosos del planeta. Una de las razones por
las cuales son tan exitosas es porque pueden utilizar una amplia variedad de
fuentes de alimento. Algunas bacterias llevan a cabo la fotosíntesis, proceso
mediante el cual utilizan la energía lumínica y el dióxido de carbono para
sintetizar su alimento (autótrofas), algo parecido a lo que realizan las
plantas. Otras obtienen su energía de moléculas inorgánicas como azufre,
amoniaco o nitritos (quimiolitótrofas) y algunas más se alimentan de la materia
orgánica en descomposición (quimioorganótrofas).
Medios de
cultivo.
Uno
de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo.
Se han preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para
que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe
reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y
presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
La
mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en
composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de
muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la
que se añadirán otros ingredientes.
El
agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de
cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se
solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto
sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen
en él.
La
Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que
bastantes bacterias provocan su licuación.
En
los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de
enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc.
Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar
el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentación de los
microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se
añaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
También
se añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar, por ejemplo, la
formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de
otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH básico y
amarillo en pH ácido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que
impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas).
Tipos de medios
de cultivo
según sus propiedades físicas
Sólidos
Contienen agar: unos 12-15 g/litro.
Son sólidos por debajo de 45 ºC. Por encima de esta
temperatura de encuentran en estado líquido.
Semisólidos
Contienen una pequeña cantidad de agar: unos 3 g/litro.
Líquidos
No
contienen ningún agente solidificante.
Según su uso
Generales
Permiten el desarrollo de una gran
variedad de microorganismos . Por ejemplo el caldo nutritivo que contiene
peptona, extracto de carne, extracto de levadura y cloruro sódico, es un medio
rico en nutrientes y que no contiene ningún agente selectivo.
Enriquecidos
Suelen ser medios con nutrientes simples
pero que además contienen factores de crecimiento especiales como por ejemplo
sangre o suero. Son medios destinados al cultivo de microorganismos muy
exigentes.
Ejemplo: el "Agar Sangre" se
utiliza para el cultivo de algunos estreptococos muy exigentes.
Selectivos
Permiten el crecimiento de un tipo de
microorganismos determinado, inhibiendo el desarrollo de otros.
Selectivos inhibidores de Gram+
Por ejemplo algunos medios de cultivo
contienen sales biliares u otras sustancias como cristal violeta o verde
brillante que inhiben el crecimiento de las bacterias gram +. Estos medios de
cultivo son, entre otros, "agar MacConkey", "agar Eosina- Azul
de Metileno" y "agar Endo"
Selectivos antibióticos
Otros medios selectivos lo son porque
contienen uno o más antibióticos que inhiben el crecimiento de ciertos
microorganismos. Por ejemplo el "agar SPS" (agar Sulfito sódico-
Polimixina- Sulfadiacina) se utiliza para el recuento de clostridios
sulfito-reductores en aguas. Contiene dos inhibidores (Polimixina y
Sulfadiacina) que impiden el crecimiento de varios microorganismos distintos de
los clostridos.
TÉCNICA
Para la presente práctica se tomaron
muestras de bacterias en diferentes puntos de interés en la escuela.
La forma en que se tomaron muestras las
muestras fue: con un hisopo que se encontraba sellado, el hisopo se frota en el
sitio de interés y luego se deposita en un tubo de ensayo que deberá ser
tapado.
Posterior a esto se llevan las muestras
al laboratorio donde se realizará el cultivo.
El cultivo se realizó con placas de petri
con agar, que se habían preparado previamente, estas se colocaron en una mesa
previamente esterilizada, para ser inoculadas con los hisopos de donde tomamos
las muestras.
Los resultados del cultivo se vieron un
par de semanas después.
Para conocer más en detalle las bacterias
se realizó una tinción de Gram.
los resultados se muestran en la
siguiente tabla
|
Lugar de toma
|
Morfología
|
tinción de Gram
|
Color
|
Mesa
|
|
teclado del prof. Pedro
|
puntos y círculos
|
Gram-
|
Blanco
|
1
|
|
Barandal de academia
|
puntos elevados y partes planas
|
Gram+
|
Grises, blancos y negros
|
2
|
|
Perilla de una puerta
|
Bacilos y estreptococos
|
Gram-
|
Rosa
|
3
|
|
Garganta de Daniela
|
puntos amontonados que formaban una colonia
|
Gram+
|
Rosa
|
4
|
|
Celular de Christian
|
pequeños puntos
|
Gram+
|
Blanco
|
5
|
|
Huellas dactilares
|
puntos planos y redondos
|
Gram-
|
Blanco
|
6
|
Referancias
Los Medios De Cultivo En
Microbiologa, www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm.
Bacterias | Biodiversidad Mexicana,
www.biodiversidad.gob.mx/especies/gran_familia/Bacterias/bacteria.html.
Benito, Cristina. Microbiología
De Los Sistemas Acuáticos,
aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/curso/UNI_02/u2c2s2.htm.
Resultados 
De acuerdo con la
prueba de la cinta se obtuvo 1.5cm (20.5%) de tierra gruesa y .5 cm (6.8%) de
tierra fina y